凱氏定(ding)氮儀(yi)精準測(ce)定(ding)糧(liang)食(shi)粗蛋白的步驟

  1 原(yuan)理
　　在樣品(pin)消(xiao)化(hua)液中(zhong)加入(ru)適(shi)量鋁片(pian)和固氫(qing)氧(yang)化(hua)納(na)，從(cong)而(er)利(li)用強(qiang)堿(jian)與(yu)鋁反(fan)應(ying)產生(sheng)氫氣(qi)和大量熱，使樣(yang)品(pin)消(xiao)化(hua)液中(zhong)的按鹽(yan)以氨的(de)形式排(pai)出：
　　NH3隨著(zhe)HZ進入(ru)硼(peng)酸吸收液被(bei)吸收，後(hou)通過鹽(yan)酸滴定(ding)硼(peng)酸吸收液所(suo)消(xiao)耗(hao)的體(ti)積數(shu)，即(ji)可確(que)定樣(yang)品(pin)中(zhong)粗蛋白含(han)量。
　　2 材料與(yu)方法(fa)
　　2.1材料
　　2.1.1試(shi)劑(ji)分(fen)析(xi)純固體(ti)氫氧(yang)化(hua)鈉。鋁(lv)片：用輸(shu)液瓶(ping)鋁(lv)蓋，每(mei)個(ge)剪成(cheng)4小(xiao)片(pian)，並預(yu)先(xian)用5%NaOH浸(jin)泡(pao)數(shu)分鐘，然後(hou)用清(qing)水(shui)洗(xi)至中(zhong)性(xing)，涼(liang)幹(gan)；也(ye)可用鋁(lv)電(dian)線打壓成(cheng)片狀，經洗滌處理。其它(ta)試劑(ji)同(tong)GB.
　　2.1.2樣(yang)品(pin)面(mian)粉(fen)、不米(mi)面(mian)、小(xiao)米(mi)、大(da)米(mi)，
　　2.2方法(fa)
　　2.2.1樣(yang)品(pin)消(xiao)化(hua)同(tong)GB方法(fa)。
　　2.2.2瀏(liu)定(ding)取5ml定容混勻(yun)的消(xiao)化(hua)液於(yu)25oml三(san)角(jiao)瓶(ping)中(zhong)，加新蒸餾水(shui)Zoml,加29鋁片(pian)，後(hou)加59固體(ti)NaOH,立即(ji)蓋(gai)上帶(dai)有彎管的橡(xiang)皮(pi)塞(sai)，並將彎管末端(duan)插(cha)入(ru)盛有30ml%硼(peng)酸液內(nei)km深處（硼(peng)酸液預(yu)先(xian)加2滴混(hun)合(he)指示劑(ji)），反(fan)應(ying)10分鐘。取(qu)下(xia)吸收瓶，用olmol/L鹽(yan)酸標(biao)準液滴定(ding)至淺紫(zi)色即(ji)達(da)終點(dian)，同(tong)時(shi)做(zuo)空白試驗，然後(hou)根據(ju)滴定(ding)消(xiao)耗(hao)鹽(yan)酸量，按GB計(ji)算公(gong)式計(ji)算樣(yang)品(pin)粗蛋白幹基含(han)量。
　　3 結(jie)論與討論(lun)
　　3.1實(shi)驗(yan)結(jie)果
　　3.1.1對(dui)比(bi)實(shi)驗(yan)在與原(yuan)標(biao)準方法(fa)對(dui)比(bi)試(shi)驗(yan)中(zhong)，二者(zhe)結(jie)果無顯著差(cha)異（P>0.05）月。改(gai)進法(fa)測(ce)定(ding)結(jie)果略高八(ba)方麽(me)。實(shi)驗(yan)見表(biao)1
　　3.1.2準(zhun)確(que)度與(yu)精度實(shi)驗(yan)選(xuan)用分(fen)析(xi)純硫酸錢作標(biao)準物進行含(han)氮量試驗(yan)，其結(jie)果見表(biao)2.由(you)表(biao)2可見，改(gai)進法(fa)測(ce)定(ding)硫酸按含(han)氮量的標(biao)準差(cha)為0.03,變異系(xi)數(shu)為0.2%,相對(dui)wucha0.52%.
　　3.2方法(fa)討(tao)論(lun)
　　3.2.1本法(fa)特(te)點(dian) 所需(xu)凱氏定(ding)氮儀(yi)設備(bei)簡單(dan)，試劑(ji)亦(yi)極為普通，操作更為簡便(bian)、快速，無需(xu)加熱設備(bei)，既(ji)節約費用，又便(bian)於(yu)基(ji)層(ceng)推廣。
　　3.2.2實(shi)驗(yan)條(tiao)件
　　選(xuan)擇(ze)本法(fa)中(zhong)固體(ti)NaOH和鋁片(pian)的(de)使用量直(zhi)接(jie)影響(xiang)著(zhe)樣(yang)品(pin)消(xiao)化(hua)液中(zhong)氨的(de)蒸餾與吸收程度(du)，為此(ci)，我(wo)們用已(yi)知(zhi)蛋白質(zhi)含(han)量樣品(pin)，並采取其它實(shi)驗(yan)條(tiao)件不(bu)變(bian)，而僅(jin)改(gai)變某(mou)壹條件量進行了(le)鋁片、固(gu)體NaOH加入(ru)量和蒸餾反(fan)應(ying)時間(jian)的(de)試驗，初(chu)步結(jie)果我(wo)們認(ren)為：鋁片(pian)29,固(gu)NaOH5g,反(fan)應(ying)蒸餾時間(jian)10分(fen)鐘，即(ji)可達(da)到較(jiao)滿(man)意的測定效(xiao)果(guo)。
　　3.2.3實(shi)驗(yan)註(zhu)意事項(xiang)
　　3.2.3.1實(shi)驗(yan)中(zhong)有大(da)量HZ放出，所以(yi)需(xu)註(zhu)意避免明火。
　　3.2.3.2樣(yang)品(pin)消(xiao)化(hua)液要(yao)隨稀釋(shi)隨(sui)蒸餾測足，不(bu)能(neng)放置(zhi)太(tai)久(jiu)，否(fou)nylJ影響(xiang)測(ce)定(ding)結(jie)果。
　　3.2.3.3加入(ru)鋁(lv)和氫氧(yang)化(hua)鈉時(shi)。其順(shun)序不(bu)可顛倒(dao)，且(qie)鋁(lv)片(pian)不(bu)要(yao)剪得過碎(sui)，否則(ze)，產生(sheng)H:速度過快，會影響(xiang)硼(peng)酸對(dui)氨的(de)吸收效(xiao)果(guo)。
　　3.23.4蒸燦元(yuan)畢(bi)後(hou)樣品(pin)殘液堿(jian)度(du)較大，需(xu)註(zhu)意防(fang)腐和燒(shao)傷(shang)；另外(wai)，導管末端(duan)需(xu)用少(shao)量蒸餾水(shui)沖(chong)洗(xi)二次(ci)，洗(xi)液入(ru)硼(peng)酸吸收液。