微生物限(xian)度檢測儀在飼料(liao)中有(you)害(hai)微生物快速(su)檢(jian)測技(ji)術

微(wei)生(sheng)物(wu)限(xian)度檢測儀在飼料(liao)中有(you)害(hai)微生物快速(su)檢(jian)測技(ji)術

蛋(dan)白質芯(xin)片技術(shu)
　　蛋(dan)白質芯(xin)片技術(shu)又(you)稱蛋(dan)白質陣(zhen)列，是(shi)指將已知(zhi)的(de)大(da)量(liang)蛋(dan)白質固(gu)定在經(jing)化學修(xiu)飾的(de)固相(xiang)載體(ti)上(shang)，在保(bao)留(liu)蛋(dan)白質物(wu)化性質的(de)基(ji)礎上(shang)，蛋(dan)白質與載體(ti)表面(mian)結合(he)，再用(yong)激光(guang)掃描(miao)系(xi)統(tong)或者電(dian)感(gan)耦合(he)器(qi)件獲(huo)取(qu)相(xiang)關(guan)圖(tu)像；然(ran)後用(yong)專(zhuan)門的(de)計算(suan)機軟(ruan)件(jian)分(fen)析圖(tu)像、定(ding)性(xing)定量(liang)結(jie)果。Howell等采(cai)用俗(su)稱軟(ruan)蝕刻(ke)的(de)微接(jie)觸印(yin)刷(shua)技術(shu)制(zhi)作出(chu)了壹種可(ke)以(yi)檢(jian)測大(da)腸(chang)桿菌(jun)E.coli O157∶H7及(ji)鮭(gui)腎(shen)桿菌(jun)的(de)抗體(ti)微陣(zhen)列，結(jie)果表明(ming)：此芯片與其他(ta)有(you)害(hai)微生物的(de)交(jiao)叉(cha)反應少(shao)，檢(jian)出(chu)濃(nong)度為7×107cfu/ml，檢(jian)測(ce)時間(jian)是40min，是壹種很(hen)有(you)效的(de)微生(sheng)物檢測方(fang)法。
　　方(fang)珍(zhen)建立(li)了檢測E.coli O157
　　H7的(de)液相(xiang)蛋(dan)白芯片(pian)方(fang)法。通(tong)過繪制(zhi)檢測(ce)曲線(xian)，分(fen)別(bie)應用(yong)該(gai)方(fang)法及(ji)H2O作溶解(jie)劑的(de)液相(xiang)芯片方(fang)法檢(jian)測(ce)實際(ji)牛(niu)肉樣(yang)品。比較(jiao)該(gai)方(fang)法與細菌(jun)分(fen)離培(pei)養法的(de)陽性(xing)檢出(chu)率，能(neng)檢出(chu)陽(yang)性(xing)的(de)低濃(nong)度為103cfu/ml，低檢(jian)出(chu)限(xian)為100cfu/ml；與18種腸(chang)道菌(jun)無(wu)交(jiao)叉(cha)反應，特異性(xing)良好(hao)；3次重復實驗(yan)，批(pi)間變異系(xi)數7.61，重復性良好(hao)；應用(yong)該(gai)方(fang)法檢(jian)測(ce)牛肉樣(yang)品中人(ren)工(gong)添加細菌(jun)，能(neng)檢出(chu)陽(yang)性(xing)的(de)低濃(nong)度為0.5cfu/ml；應用(yong)該(gai)方(fang)法檢(jian)測(ce)154份實際(ji)牛(niu)肉樣(yang)品，檢出(chu)陽(yang)性(xing)樣(yang)品19份，而(er)細菌(jun)培(pei)養法檢(jian)出(chu)陽(yang)性(xing)樣(yang)品16份。蛋(dan)白質芯(xin)片技術(shu)是(shi)壹種高特異性(xing)、高(gao)靈敏度、高通量(liang)、重復性好、應用(yong)性(xing)強、適(shi)用(yong)範(fan)圍(wei)廣(guang)且(qie)微型(xing)化(hua)的(de)分(fen)析技(ji)術，在生(sheng)命科學的(de)各(ge)個研究領(ling)域(yu)有(you)很(hen)好的(de)發展(zhan)前(qian)景(jing)，但(dan)同基(ji)因芯片(pian)技術(shu)壹(yi)樣(yang)，檢(jian)測費(fei)用高，發(fa)展還(hai)不成(cheng)熟(shu)。
　　納(na)米(mi)金標(biao)記技(ji)術
　　納(na)米(mi)金標(biao)記技(ji)術是指直(zhi)徑在1nm—100nm金的(de)微小(xiao)顆(ke)粒(li)，具有(you)高(gao)電(dian)子密(mi)度，介電(dian)特性(xing)和催化作用，可(ke)以(yi)與多種(zhong)生(sheng)物大(da)分(fen)子結(jie)合(he)，且(qie)不影(ying)響(xiang)生物大(da)分(fen)子的(de)生物(wu)活性。近(jin)年(nian)來(lai)，基(ji)於納(na)米(mi)金標(biao)記的(de)快速(su)檢(jian)測研究在有(you)害(hai)微生物方(fang)面應用(yong)比(bi)較多，檢測的(de)微生(sheng)物種類也(ye)比較(jiao)多，國內(nei)外科技(ji)工(gong)作者通過對納(na)米(mi)金顆(ke)粒(li)表面(mian)特性(xing)的(de)處理(li)以(yi)及(ji)在納(na)米(mi)金顆(ke)粒(li)表面(mian)標記上(shang)特定(ding)的(de)寡(gua)核(he)苷(gan)酸(suan)探針，開發(fa)研究出(chu)了新(xin)的(de)微生(sheng)物檢測系(xi)統(tong)。
　　利用(yong)氨基(ji)偶聯(lian)法(fa)在傳感器(qi)表面(mian)固定多克(ke)隆(long)抗體(ti)作為壹(yi)抗，金納(na)米(mi)粒(li)子標(biao)記(ji)的(de)大(da)腸(chang)桿菌(jun)E.coli O157∶H7的(de)多克(ke)隆(long)抗體(ti)作為二(er)抗，通過三明(ming)治(zhi)方(fang)法用(yong)雙(shuang)通道表面(mian)等離(li)子體(ti)共振傳感器(qi)對E.coli O157∶H7進(jin)行(xing)檢(jian)測。SPR直(zhi)接(jie)法(fa)檢出(chu)限(xian)為103cfu/ml，線(xian)性範(fan)圍(wei)為103cfu/ml—109cfu/ml；金(jin)納(na)米(mi)粒(li)子增(zeng)強三明(ming)治(zhi)法(fa)的(de)檢出(chu)限(xian)為10cfu/ml，線(xian)性範(fan)圍(wei)為10cfu/ml—1010cfu/ml，靈(ling)敏度提(ti)高(gao)100倍(bei)，檢測(ce)範圍更寬，檢(jian)測(ce)時間(jian)縮(suo)短，選擇(ze)性(xing)和重現性(xing)較(jiao)好。此(ci)技術具有(you)簡(jian)單、快速(su)、靈(ling)敏度高、特異性(xing)強、價(jia)廉、樣(yang)品所需(xu)量(liang)少(shao)等優點，適合(he)現場(chang)篩(shai)選，在飼料(liao)檢測(ce)中(zhong)有(you)著(zhe)廣(guang)泛(fan)的(de)應用(yong)價(jia)值和發展前(qian)景(jing)。
　　目前(qian)，生物(wu)學領(ling)域(yu)的(de)專家(jia)通過對微(wei)生(sheng)物快速(su)檢(jian)測方(fang)面深入(ru)的(de)研究，開發(fa)了壹系(xi)列技(ji)術(shu)，有(you)ATP熒(ying)光儀、多功(gong)能(neng)微生物(wu)熒光(guang)檢測(ce)儀、微生物實時(shi)光(guang)電(dian)檢(jian)測系(xi)統(tong)、紙片(pian)法。這些(xie)用(yong)於食品中有(you)害(hai)微生物的(de)快速(su)檢(jian)測技(ji)術，未來同樣(yang)可(ke)以在飼料(liao)中應用(yong)，這(zhe)些(xie)方(fang)法的(de)應用(yong)將(jiang)為飼料(liao)安全(quan)提(ti)供有(you)力(li)的(de)保(bao)障(zhang)，同時(shi)可(ke)以促進(jin)我(wo)國(guo)飼料(liao)工(gong)業(ye)的(de)持續健康發展。下面(mian)重點(dian)介(jie)紹常(chang)用(yong)的(de)兩種(zhong)有(you)害(hai)微生物快速(su)檢(jian)測設(she)備(bei)。
　　微生物(wu)快速(su)檢(jian)測系(xi)統(tong)
　　高性(xing)能(neng)便攜(xie)式微生(sheng)物檢(jian)測(ce)儀將多種檢(jian)驗(yan)方(fang)法的(de)優點集合(he)應用(yong)，如(ru)培養皿法、酶(mei)法、免(mian)疫法、基(ji)因法，具有(you)便捷(jie)、操(cao)作簡單(dan)、檢(jian)驗迅速(su)、高(gao)靈敏性(xing)、高特異性(xing)、消(xiao)耗(hao)成(cheng)本(ben)低、定(ding)性(xing)半(ban)定(ding)量(liang)測(ce)量(liang)等諸(zhu)多(duo)優點。
　　快速(su)檢(jian)測對(dui)象:活菌(jun)總數、大(da)腸(chang)菌(jun)群、大(da)腸(chang)桿菌(jun)、腸(chang)道桿菌(jun)科(ke)、金黃(huang)色(se)葡萄球(qiu)菌(jun)、綠(lv)膿(nong)桿菌(jun)、沙(sha)門氏菌(jun)、李(li)斯特菌(jun)、腸(chang)球(qiu)菌(jun)、產氣(qi)莢膜梭菌(jun)、亞(ya)硫(liu)酸鹽還原(yuan)梭(suo)狀(zhuang)芽孢桿菌(jun)、黴(mei)菌(jun)(、酵(jiao)母菌(jun)、軍團菌(jun)等，可(ke)以(yi)定量(liang)檢(jian)測(ce)。
　　快速(su)檢(jian)測產品特點(dian)有(you)應用(yong)範(fan)圍廣(guang)，應用(yong)於食品、飼料(liao)、藥品、水(shui)質、空(kong)氣(qi)微生(sheng)物檢測等眾(zhong)多(duo)領(ling)域(yu)，可檢(jian)測(ce)固(gu)態(tai)、液(ye)態(tai)、氣(qi)態(tai)及(ji)膏狀(zhuang)、漿狀(zhuang)等多(duo)種(zhong)樣(yang)本(ben)。使(shi)用(yong)方(fang)便：壹(yi)套(tao)便攜(xie)系(xi)統(tong)即可(ke)完成(cheng)采(cai)樣(yang)、實驗(yan)、後處理(li)等工(gong)作，無需(xu)配備(bei)多種檢(jian)測(ce)儀器(qi)。操作簡單(dan)：檢(jian)測樣(yang)本(ben)只(zhi)需(xu)1ml或1g，且(qie)無需(xu)前(qian)處理(li)，只(zhi)需(xu)3個步(bu)驟就(jiu)可完(wan)成(cheng)操作。高靈(ling)敏度：可檢測(ce)到(dao)數量(liang)級(ji)為1cfu的(de)目標微生物(wu)，滿(man)足(zu)國內(nei)國際(ji)微(wei)生(sheng)物(wu)檢(jian)測標準(zhun)。高特異性(xing)：特異性(xing)高(gao)達(da)99.999%，杜(du)絕非目標微生物(wu)造成(cheng)的(de)實驗(yan)幹(gan)擾(rao)。準(zhun)確(que)度高：可定(ding)量(liang)分(fen)析。檢(jian)測數量(liang)：8個插(cha)槽(cao)可同(tong)時(shi)提(ti)供8項不同(tong)實驗(yan)，13類(lei)不同(tong)標(biao)準(zhun)培養(yang)環(huan)境。快速(su)檢(jian)測：快10min即可(ke)得到(dao)檢測(ce)結(jie)果，可用於現場(chang)檢(jian)測(ce)。高(gao)智(zhi)能(neng)化：能(neng)夠自動控制(zhi)孵(fu)育溫(wen)度和孵(fu)育時(shi)間(jian)，並可自(zi)動生(sheng)成(cheng)實驗(yan)報(bao)告。全自(zi)動化(hua)：獨立(li)、持續地檢(jian)測(ce)並記(ji)錄(lu)瓶(ping)中(zhong)的(de)微生(sheng)物數量(liang)。
　　將(jiang)激(ji)光掃描(miao)合(he)成(cheng)成(cheng)像技(ji)術(shu)與活細胞熒光酶標(biao)記相結合(he)，研制(zhi)成(cheng)功(gong) RDI微生(sheng)物快速(su)檢(jian)測儀。該儀器(qi)可在(zai)1.5小(xiao)時(shi)內(nei)對可(ke)過濾樣(yang)品中的(de)微生(sheng)物及(ji)原(yuan)生(sheng)蟲(chong)進行(xing)快速(su)計(ji)數，適於食品、飼料(liao)，化妝品及(ji)藥品行業(ye)。其(qi)特點(dian)：只(zhi)檢測活(huo)細胞數，激光(guang)對(dui)整(zheng)張濾膜掃描(miao)後自(zi)動讀數，速度極快、無(wu)需(xu)增(zeng)菌(jun)，可(ke)在90—l00min內(nei)出(chu)結(jie)果；可選配熒光顯(xian)微(wei)鏡與儀器(qi)連(lian)接(jie)，自(zi)動定(ding)位(wei)對可(ke)疑微生物進行(xing)確(que)認觀(guan)察(cha)。靈敏度：可檢測(ce)出(chu)1個微生物或(huo)原(yuan)生(sheng)蟲(chong)；檢測(ce)範圍(wei)：1—5000個細胞。