範式洗滌(di)劑法--木(mu)質纖(xian)維素(su)測定標準(zhun)方(fang)法

範式洗滌(di)劑法--木(mu)質纖(xian)維素(su)測定標準(zhun)方(fang)法

原理:
采用範式（Van Soest ）的(de)洗滌(di)纖(xian)維分析法測定中(zhong)性洗滌(di)纖(xian)維（NDF）和酸性(xing)洗滌(di)纖(xian)維（ADF）原理：
植(zhi)物性(xing)飼料經中(zhong)性(xing)洗滌(di)劑煮沸處理，不(bu)溶解的(de)殘渣(zha)為中性洗滌(di)纖(xian)維，主(zhu)要為細(xi)胞壁成分，其中包(bao)括板纖(xian)維素(su)、纖(xian)維素(su)、木(mu)質素(su)和矽酸(suan)鹽(yan)。植(zhi)物性(xing)飼料經酸(suan)性(xing)洗滌(di)劑處理(li)，剩余的(de)殘渣(zha)為酸性洗滌(di)纖(xian)維，其中包(bao)括纖(xian)維素(su)、木(mu)質素(su)和矽酸(suan)鹽(yan)。酸性(xing)洗滌(di)纖(xian)維經72%硫(liu)酸(suan)處理(li)後的(de)殘渣(zha)為木(mu)質素(su)和矽酸(suan)鹽(yan)，從酸性洗滌(di)纖(xian)維值(zhi)中減(jian)去(qu)72%硫(liu)酸(suan)處理後的(de)殘渣(zha)為飼料的(de)纖(xian)維素(su)含(han)量(liang)。將72%硫(liu)酸(suan)處理(li)後的(de)殘渣(zha)灰(hui)化(hua)，在(zai)灰(hui)化(hua)過程中逸出的(de)部(bu)分為酸性洗滌(di)木(mu)質素(su)（SDL）的(de)含(han)量(liang)。
溶劑配(pei)制：
中(zhong)性(xing)洗滌(di)劑（3%十(shi)二烷(wan)基硫(liu)酸(suan)鈉）：準(zhun)備(bei)稱取18.6g乙二(er)胺(an)四乙酸(suan)二(er)鈉（EDTA，C10H14O8Na2.2H2O，分析純）和6.8g硼酸(suan)鈉（Na2B4O7.10H2O，分析純）放入燒杯(bei)中，加入少(shao)量蒸(zheng)餾水，加入溶解後，再加入30g十(shi)二烷(wan)基硫(liu)酸(suan)鈉（C12H25NaO4S，分析純）和10ml乙二(er)醇(chun)乙mi（C4H10O2,分析純）；再稱(cheng)取4.56g汙(wu)水磷(lin)酸氫(qing)二鈉（Na2HPO4，分析純）置於(yu)另(ling)壹(yi)燒杯(bei)中，加入少(shao)量蒸(zheng)餾水微(wei)微(wei)加熱(re)溶解後，倒(dao)入前(qian)壹(yi)個燒杯(bei)中，在(zai)容(rong)量(liang)瓶中(zhong)稀(xi)釋(shi)至1000ml，其中PH值(zhi)約(yue)為6.9-7.1（PH壹(yi)般(ban)勿(wu)需調整）；1N硫酸：量取(qu)約(yue)27.87ml濃(nong)硫酸(suan)（分析純，比(bi)重(zhong)1.84，98%），徐(xu)徐(xu)加入已(yi)裝有500ml蒸餾水的(de)燒杯(bei)中，冷卻後註(zhu)入1000ml容(rong)量瓶(ping)定容(rong)，標定；酸(suan)性(xing)洗滌(di)劑（2%十(shi)六烷(wan)三甲基(ji)溴(xiu)化(hua)銨(an)）：稱取(qu)20g十(shi)六烷(wan)三甲基(ji)溴(xiu)化(hua)銨(an)（CTAB，分析純）溶於(yu)1000ml1N硫(liu)酸，必(bi)要時(shi)過濾；
操作(zuo)步(bu)驟：
準(zhun)確(que)稱取1.0g樣(yang)品(pin)（通過40目篩）置於(yu)直(zhi)筒燒杯(bei)中，加入100ml酸(suan)性洗滌(di)劑和數滴十(shi)氫化(hua)萘(nai)及(ji)0.5g無水亞(ya)硫酸(suan)鈉。將燒杯(bei)套(tao)上冷凝裝置(zhi)於電爐上(shang)，在(zai)5-10min內(nei)煮沸，並持續保(bao)持(chi)微(wei)沸60min。趁(chen)熱(re)用已知(zhi)重(zhong)量(liang)的(de)玻(bo)璃坩(gan)堝(guo)抽濾，並(bing)用沸水反復沖洗玻(bo)璃坩(gan)堝(guo)及(ji)殘渣(zha)至濾液呈中性為止(zhi)。用少(shao)量丙(bing)酮(tong)沖洗殘渣(zha)至抽下的(de)丙(bing)酮(tong)液呈無色為主，並抽凈(jing)丙(bing)酮(tong)，將玻(bo)璃坩(gan)堝(guo)置(zhi)於(yu)105度烘(hong)箱(xiang)中烘2h後，在(zai)幹(gan)燥器(qi)中(zhong)冷卻30min稱重，直(zhi)稱(cheng)到(dao)恒重。
酸(suan)性洗滌(di)木(mu)質素(su)和酸不(bu)溶灰(hui)分（AIA）測定
將酸(suan)性(xing)洗滌(di)纖(xian)維加入72%硫(liu)酸，在(zai)20度消(xiao)化(hua)3h後過濾，並(bing)沖洗至中性(xing)。消(xiao)化(hua)過程中溶解部(bu)分為纖維素(su)，不(bu)溶解的(de)殘渣(zha)為酸性洗滌(di)木(mu)質素(su)和酸不(bu)溶灰(hui)分，將殘渣(zha)烘(hong)幹(gan)並灼燒灰化(hua)後即可得(de)出酸洗洗滌(di)木(mu)質素(su)和酸不(bu)溶灰(hui)分的(de)含(han)量(liang)。

實驗步(bu)驟
1、 中(zhong)性(xing)洗滌(di)纖(xian)維測定
準(zhun)確(que)稱取1.0g樣(yang)品(pin)W（通過40目篩）置於(yu)直(zhi)筒燒杯(bei)中，加入100ml中(zhong)性洗滌(di)劑和數滴十(shi)氫化(hua)萘(nai)及(ji)0.5g無水亞(ya)硫酸(suan)鈉。
將燒杯(bei)套(tao)上冷凝裝置(zhi)於電爐上(shang)，在(zai)5-10min內(nei)煮沸，並持續保(bao)持(chi)微(wei)沸60min。（註(zhu)意加水保(bao)持(chi)刻(ke)度在(zai)100ml）
煮沸完畢(bi)後，取(qu)下直(zhi)筒燒杯(bei)，趁熱(re)用已知(zhi)重(zhong)量(liang)的(de)玻(bo)璃坩(gan)堝(guo)W2進(jin)行(xing)抽濾，將燒杯(bei)中的(de)殘渣(zha)全(quan)部(bu)移入，並(bing)用沸水沖洗玻(bo)璃坩(gan)堝(guo)與(yu)殘渣(zha)，直(zhi)洗至濾液呈中性為止(zhi)。
用20ml內酮(tong)沖洗二(er)次(ci)，抽濾。
將玻(bo)璃坩(gan)堝(guo)置(zhi)105度烘(hong)箱(xiang)中烘2h後，在(zai)幹(gan)燥器(qi)中(zhong)冷卻30min稱重，直(zhi)稱(cheng)至恒重W1。
中(zhong)性洗滌(di)纖(xian)維含(han)量(liang)的(de)計(ji)算：NDF（%）=（W1-W2）/W*100

2、 酸性(xing)洗滌(di)纖(xian)維測定
準(zhun)確(que)稱取1.0g樣(yang)品(pin)G（通過40目篩）置於(yu)直(zhi)筒燒杯(bei)中，加入100ml酸(suan)性洗滌(di)劑和數滴十(shi)氫化(hua)萘(nai)及(ji)0.5g無水亞(ya)硫酸(suan)鈉。
將燒杯(bei)套(tao)上冷凝裝置(zhi)於電爐上(shang)，在(zai)5-10min內(nei)煮沸，並持續保(bao)持(chi)微(wei)沸60min。趁(chen)熱(re)用已知(zhi)重(zhong)量(liang)的(de)玻(bo)璃坩(gan)堝(guo)G2抽濾，並(bing)用沸水反復沖洗玻(bo)璃坩(gan)堝(guo)及(ji)殘渣(zha)至濾液呈中性為止(zhi)。
用少(shao)量丙(bing)酮(tong)沖洗殘渣(zha)至抽下的(de)丙(bing)酮(tong)液呈無色為止(zhi)，並(bing)拍(pai)凈(jing)丙(bing)酮(tong)。
將玻(bo)璃坩(gan)堝(guo)置(zhi)於(yu)105度烘(hong)箱(xiang)中烘2H後，在(zai)幹(gan)燥器(qi)中(zhong)冷卻30min稱重，直(zhi)稱(cheng)至恒重G1。
酸(suan)性洗滌(di)纖(xian)維含(han)量(liang)的(de)計(ji)算：ADF（%）=（G1-G2）/G*100
半纖(xian)維素(su)含(han)量(liang)的(de)計(ji)算：ADS（%）=NDF（%）-ADF（%）

3、 酸性(xing)洗滌(di)木(mu)質素(su)和酸不(bu)溶灰(hui)分（AIA）測定
把(ba)酸(suan)性(xing)洗滌(di)纖(xian)維置(zhi)於(yu)50ml燒杯(bei)中，加入5ml72%硫(liu)酸，20度水解3h，然(ran)後加水45ml，室溫過夜(ye)，次(ci)日用已稱(cheng)恒重的(de)3號砂(sha)芯漏鬥H2過濾，水洗殘渣(zha)使(shi)濾液至PH6.5，於60度烘(hong)幹(gan)，稱重(zhong)H1。把(ba)剩(sheng)余殘渣(zha)在(zai)馬弗(fu)爐中(zhong)550度經2.5H灰(hui)化(hua)，測得灰(hui)分重量H3。
纖維素(su)含(han)量(liang)的(de)計(ji)算：纖維素(su)= ADF(%)-經72%硫(liu)酸(suan)處理(li)後的(de)殘渣(zha)（%） (H1-H2)/G*100
酸(suan)性洗滌(di)木(mu)質素(su)（ADL）含(han)量(liang)的(de)計(ji)算：ADF(%)=殘渣(zha)(%)-灰(hui)分（矽酸鹽(yan)，%）=(H1-H2-H3)/G*100



結(jie)果計(ji)算：
中性(xing)洗滌(di)纖(xian)維含(han)量(liang)的(de)計(ji)算：NDF（%）=（W1-W2）/W*100
式中(zhong)：
W1-----玻(bo)璃坩(gan)堝(guo)和NDF重（g）
W2-----玻(bo)璃坩(gan)堝(guo)重(zhong)（g）
W---試(shi)樣(yang)重(zhong)（g）

酸(suan)性(xing)洗滌(di)纖(xian)維含(han)量(liang)的(de)計(ji)算：ADF（%）=（G1-G2）/G*100
式中(zhong)：
G1----玻(bo)璃坩(gan)堝(guo)和A
DF重（g）
G2-----玻(bo)璃坩(gan)堝(guo)重(zhong)（g）
G---試(shi)樣(yang)重(zhong)（g）

半(ban)纖(xian)維素(su)含(han)量(liang)的(de)計(ji)算：半纖(xian)維素(su)%=NDF(%)-ADF(%)
纖(xian)維素(su)含(han)量(liang)的(de)計(ji)算：纖維素(su)= ADF(%)-經72%硫(liu)酸(suan)處理(li)後的(de)殘渣(zha)（%）
酸(suan)性洗滌(di)木(mu)質素(su)（ADL）含(han)量(liang)的(de)計(ji)算：ADF(%)=殘渣(zha)(%)-灰(hui)分（矽酸鹽(yan)，%）